Caracterización molecular de las cepas de arteritis viral equina aisladas en Argentina

Abstract

El virus de Arteritis Equina (VAE), perteneciente a la familia Arteriviridae, ocasiona infecciones, en su mayoría subclínicas, aunque puede causar abortos y enfermedad respiratoria en adultos y neumonía en potrillos. Los ORF5 y ORF6 de su genoma codifican las proteínas de envoltura GP5 y M, respectivamente, cuya interacción es crítica para la infectividad y expresión de determinantes antigénicos del virus. Existe un solo serotipo de virus, aunque hay variabilidad entre aislamientos de regiones geográficas diferentes. Los primeros aislamientos en Argentina se realizaron en nuestro laboratorio entre los años 2001 (cepa LP01) y 2002 (cepas LP02/R, LP02/C y LP02/P). En este trabajo se analizó el fenotipo de los aislamientos, en primera instancia, por la técnica de virusneutralización. Luego se realizó un rastreo de la variabilidad de las secuencias codificantes de las proteínas M y GP5 por los métodos de PCR-RFLP y PCRSSCP. Finalmente se secuenciaron parte de los ORFs 5 y 6 y las secuencias obtenidas se analizaron comparativamente con la cepa Bucyrus y las secuencias disponibles en la base de datos GenBank. Todas las cepas Argentinas presentaron un fenotipo de neutralización similar entre sí, y la cepa de referencia de origen americano (Bucyrus), utilizada en nuestro laboratorio, fue neutralizada en menor medida. Los cuatro aislamientos argentinos y Bucyrus mostraron patrones de SSCP distintos, al igual que diferentes patrones de RFLP. La estimación de los valores de identidad y el análisis de las relaciones filogenéticas entre las secuencias confirmaron que la cepa aislada en 2001 es diferente a las tres cepas aisladas en 2002. Además las cuatro cepas forman un grupo definido en el cluster de origen europeo. Los métodos de rastreo de variabilidad utilizados permitieron diferenciar los aislamientos argentinos, diferencias confirmadas con el análisis de las secuencias de ambos ORFs, permitiendo realizar así la primera caracterización de aislamientos de AVE en Argentina.