Sobre una nueva técnica utilizada para la concentración y purificación de toxoide diftérico

Abstract

Se estudia sistemáticamente la influencia de las peptonas, el pH y la temperatura en la precipitación por alcohol etílico al 40 % del toxoide diftérico. Conseguimos precipitar cuantitativamente el principio activo por alcohol al 40 % (—12°C) a un pH regulado y comprendido entre 4.0 y 4.75. Por alcohol etílico en las condiciones anteriores conseguimos una relación de purificación de 20 veces y llevamos el precipitado a un volumen final 10 veces menor, obteniendo alrededor de 400 Lf/ml. Así estábamos en condiciones de precipitar el toxoide diftérico concentrado y semi-purificado con ácido en su zona isoeléctrica. En esta segunda precipitación, la relación de purificación era buena y los toxoides obtenidos daban alrededor de 1 γ de N por Lf. En un caso llegamos a 0.50 γ de N por Lf. Las pérdidas en general no pasan del 10% del contenido inicial. Este toxoide así purificado y concentrado reveló su aptitud inmunizante.