Please use this identifier to cite or link to this item: http://sgc.anlis.gob.ar/handle/123456789/81
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dc.contributor.authorToranzo, Adrianaes
dc.contributor.authorTiraboschi, I. N.es
dc.contributor.authorFernández, N.es
dc.contributor.authorIbarra-Camou, B.es
dc.contributor.authorRivas, María Cristinaes
dc.contributor.authorLee, Williames
dc.contributor.authorDavel, Graciela Odelsiaes
dc.contributor.authorCanteros, C. E.es
dc.date.accessioned2012-09-21T23:43:34Z-
dc.date.available2012-09-21T23:43:34Z-
dc.date.issued2009-
dc.identifier.issn0325-7541-
dc.identifier.urihttp://sgc.anlis.gob.ar/handle/123456789/81-
dc.identifier.urihttp://www.scielo.org.ar/pdf/ram/v41n1/v41n1a04.pdf-
dc.descriptionSe evaluó el uso de sangre entera para el diagnóstico molecular de histoplasmosis utilizando un método artesanal de extracción de ADN fúngico y una PCR anidada que amplifica una porción del gen HcP100 específica de Histoplasma capsulatum. La sangre entera se trató con liticasa, enzima lisante de Trichoderma harzianum y proteinasa K, seguido de una extracción fenólica. Este tratamiento permitió una lisis completa de las células, mostró buen rendimiento en la obtención de ADN y posibilitó la detección de la banda de 210 pb específica de H. capsulatum en la PCR anidada. El límite de detección fue de 0,25-1 levaduras/ml de sangre. El método se evaluó en 31 muestras de sangre de 19 pacientes con diagnóstico microbiológico de histoplasmosis, en 21 muestras de pacientes con otras micosis o infecciones por micobacterias y en 30 controles sanos. La PCR fue positiva en sangre para 17/19 pacientes con histoplasmosis (14/15 inmunocomprometidos y 3/4 sin inmunocompromiso aparente). Las muestras de sangre de los 30 controles sanos y de 20 pacientes con otras patologías fueron negativas, sólo hubo un falso positivo correspondiente a un paciente con infección por Mycobacterium avium-intracellulare. El método presentó 89% de sensibilidad y 96% de especificidad para el diagnóstico de histoplasmosis en sangre entera.en_US
dc.descriptionTo assess the value of using whole blood samples for the molecular diagnosis of histoplasmosis, we applied an in-house DNA extraction method and a nested PCR targeting a 210 bp specific segment of the Histoplasma capsulatum HcP100 gene. A whole blood volume of 2.5-3 milliliters was centrifuged and the cellular pellet was treated with Trichoderma harzianum lyticase and proteinase K prior to applying a conventional phenol DNA extraction. This procedure allowed complete cell lysis, high DNA yield and specific amplification. The PCR detection limit was 0.25-1 yeast cells/ml of blood sample. The method was assessed on 31 blood samples from 19 patients with microbiological diagnosis of histoplasmosis, 30 healthy persons and 21 patients with other mycoses or mycobacterial diseases. Positive results were obtained in samples from 17/19 patients with histoplasmosis (14/15 immunocompromised and 3/4 without known immunological disorder). Blood samples from the 30 healthy controls and 20 patients with other conditions proved negative; the only false positive result was obtained from a patient with Mycobacterium avium-intracellulare infection. With 89% sensitivity and 98% specificity, this molecular method for detection of the agent in blood shows promising for the rapid diagnosis of human histoplasmosis.en_US
dc.descriptionFil: Toranzo, A. I. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.en_US
dc.descriptionFil: Tiraboschi, I. N. Universidad de Buenos Aires. División Infectología; Argentina.en_US
dc.descriptionFil: Fernández, N. Universidad de Buenos Aires. División Infectología; Argentina.en_US
dc.descriptionFil: Ibarra-Camou, B. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.en_US
dc.descriptionFil: Rivas, M. C. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.en_US
dc.descriptionFil: Lee, W. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.en_US
dc.descriptionFil: Davel, Graciela Odelsia. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.en_US
dc.descriptionFil: Canteros, C. E. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.en_US
dc.formatapplication/pdfES
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccessen_US
dc.sourceRevista Argentina de Microbiología, 2009, 41(1), 20–26.en_US
dc.subjectHistoplasmosisen_US
dc.subjectReacción en Cadena de la Polimerasaen_US
dc.subjectInfecciones por VIHen_US
dc.subjectHistoplasmaen_US
dc.titleDiagnóstico molecular de histoplasmosis humana en muestras de sangre enteraes
dc.title.alternativeMolecular diagnosis of human histoplasmosis in whole blood sampleses
dc.typeArtículoes
anlis.essnrd1es
item.openairecristypehttp://purl.org/coar/resource_type/c_18cf-
item.cerifentitytypePublications-
item.grantfulltextopen-
item.openairetypeArtículo-
item.fulltextWith Fulltext-
crisitem.author.deptAdministración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud “Dr. Carlos G. Malbrán” (ANLIS)-
crisitem.author.deptInstituto Nacional de Enfermedades Infecciosas (INEI)-
crisitem.author.deptDepartamento de Micología-
crisitem.author.deptAdministración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud “Dr. Carlos G. Malbrán” (ANLIS)-
crisitem.author.deptInstituto Nacional de Epidemiología (INE)-
crisitem.author.deptDepartamento de Vigilancia y Clínica Epidemiológica-
crisitem.author.deptPrograma Nacional de Vigilancia de Infecciones Hospitalarias de Argentina (VIHDA)-
crisitem.author.deptAdministración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud “Dr. Carlos G. Malbrán” (ANLIS)-
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crisitem.author.parentorgAdministración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud “Dr. Carlos G. Malbrán” (ANLIS)-
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crisitem.author.parentorgInstituto Nacional de Epidemiología (INE)-
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