Purificación y concentración del toxoide tetánico

Abstract

Se estudia la concentración al vacío del toxoide tetánico, comprobándose que conserva el valor primitivo. Pero este toxoide así concentrado y dializado, por las sustancias de naturaleza coloidal que contiene, no precipita bien ni por los ácidos ni por los alcoholes estudiados. El toxoide nativo, sin concentrar tampoco se puede purificar por precipitación ácida, pues la pérdida llega a dar más del 70 % del valor primitivo. Sólo dializando el toxoide nativo previamente, esta pérdida se reduce al 50 % del valor primitivo. La técnica de Pillemer (con metanol), aplicada a nuestro toxoide concentrado al vacío, da mucha pérdida (de 60 a 80 %). Con toxoide nativo, esta técnica da buenos resultados, llegándose a, obtener una purificación de 123 veces. Sin embargo, este método no es apropiado al medio de cultivo usado por nosotros, ya que usando otra técnica, pudimos llegar a una purificación mayor. Hemos obtenido buenos resultados con dos precipitaciones sucesivas con alcohol etílico, a baja temperatura, o también combinando la precipitación con alcohol y luego ácido en condiciones determinadas. Se describe también en este trabajo la preparación del medio de cultivo usado, la atenuación por el formol, la purificación del toxoide y la preparación de la vacuna. Además se clan los métodos usados para determinar la actividad del toxoide. Si al toxoide purificado, por precipitación con alcohol etílico, lo sometemos a una segunda purificación, llevándolo a su punto isoeléctrico con BUSCA, conseguimos una purificación de 312 veces (Cuadro 3) con una pérdida del 50 % de su valor inicial. No se disminuye esta pérdida, usando un ácido orgánico como precipitante. Terminamos este trabajo, dando los resultados obtenidos en la concentración y purificación del toxoide por dos precipitaciones sucesivas con alcohol etílico, a baja temperatura. ; En esta forma, concentramos los toxoides, sin pérdidas en su valor y con una purificación que en la mayor parte de los casos, sobrepasa las 200 veces. Este es un buen toxoide para la preparación de la vacuna.